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植物細(xì)胞分化原理及其影響因素
[日期:2008-07-23]  來(lái)源:中國(guó)風(fēng)景園林網(wǎng)整理編輯  作者:   發(fā)表評(píng)論(0)打印



  植物細(xì)胞與動(dòng)物細(xì)胞的差別之一就是植物細(xì)胞有全能性。植物細(xì)胞全能性(cell totipotency)的概念是1902年由德國(guó)著名植物學(xué)家Haberlandt首先提出的。他認(rèn)為,高等植物的器官和組織可以不斷分割直至單個(gè)細(xì)胞,每個(gè)細(xì)胞都具有進(jìn)一步分裂和發(fā)育的能力,并設(shè)想從一個(gè)體細(xì)胞可以得到人工培養(yǎng)的胚。20世紀(jì)50年代末由Saward等人從胡蘿卜根的韌皮部取下一塊組織,并將其置于液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),使之分化出愈傷組織,然后把從愈傷組織所得到的胚狀體轉(zhuǎn)移到固體培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng),從而獲得了完整的胡蘿卜試管植株。經(jīng)過(guò)栽培,此植株能夠正常生長(zhǎng)開(kāi)花結(jié)果,從而證實(shí)了Haberlandt的植物細(xì)胞具有“全能性”的設(shè)想。

  組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是植物細(xì)胞具有全能性,所謂細(xì)胞全能性是指每個(gè)植物的體細(xì)胞或性細(xì)胞都具有該植物的全套遺傳基因,因此在一定培養(yǎng)條件下每個(gè)細(xì)胞都可發(fā)育成一個(gè)與母體一樣的植株。要使細(xì)胞全能性表達(dá)出來(lái),形成完整植株,除了生長(zhǎng)以外,還要經(jīng)過(guò)分化、脫分化和再分化等過(guò)程。

  也就是說(shuō):一個(gè)植物細(xì)胞所具有的產(chǎn)生一個(gè)完整植株的固有能力稱作“細(xì)胞的全能性”。只要有一個(gè)完整的有生命力的細(xì)胞,即使這個(gè)細(xì)胞已經(jīng)是高度成熟和分化的細(xì)胞,也還保持著恢復(fù)到分生狀態(tài)的能力。其恢復(fù)過(guò)程取決于該細(xì)胞原來(lái)所處的自然部位,生理狀態(tài)以及外部環(huán)境條件的影響等。當(dāng)將離體組織或器官放在培養(yǎng)基上進(jìn)行離體培養(yǎng)(in vitro culture)時(shí),這些離體組織或器官就會(huì)進(jìn)行細(xì)胞分裂,形成一種高度液泡化的呈無(wú)定形態(tài)的薄壁細(xì)胞,稱為愈傷組織(callus)。

  一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài),并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象就稱為植物細(xì)胞的脫分化(differentiation)。脫分化過(guò)程的難易與植物種類、組織和細(xì)胞狀態(tài)有關(guān)。一般成年細(xì)胞和組織比幼年細(xì)胞和組織難;單倍體細(xì)胞比二倍體細(xì)胞難。切取的植物組織、器官和細(xì)胞,在人工培養(yǎng)條件下,可促進(jìn)脫分化,產(chǎn)生愈傷組織,然后將脫分化形成的愈傷組織轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng),這些無(wú)定形的愈傷組織又會(huì)重新產(chǎn)生分生組織,繼而進(jìn)行形態(tài)建成,分化出具有根、莖、,最后形成完整植株。把這種原已分化的細(xì)胞,經(jīng)脫分化培養(yǎng)后再次進(jìn)行的分化現(xiàn)象叫再分化(redifferentiation)在有些情況下,再分化也可不經(jīng)愈傷組織階段,而直接發(fā)生于脫分化的細(xì)胞。

  利用植物細(xì)胞的全能性,可以培養(yǎng)出許多細(xì)胞。隨著細(xì)胞反復(fù)的分裂,培養(yǎng)中的愈傷組織和懸浮細(xì)胞一段時(shí)間后重新開(kāi)始分化,產(chǎn)生不同類型的細(xì)胞。如:薄壁細(xì)胞、纖維細(xì)胞、導(dǎo)管和管胞、毛狀細(xì)胞、石細(xì)胞及色素細(xì)胞。在顯微鏡下易被觀察到的是有加厚的次生細(xì)胞壁的導(dǎo)管。因此,當(dāng)纖維細(xì)胞、導(dǎo)管和管胞、質(zhì)部等發(fā)生分化的過(guò)程也就是新植株重建的過(guò)程。

    在自然狀態(tài)下植物中的細(xì)胞和組織的分化是按照固定的途徑和方式進(jìn)行的。但在組織培養(yǎng)的愈傷組織中,細(xì)胞分化卻在很大程度上取決于外界環(huán)境因素。在特定的培養(yǎng)條件下,愈傷組織的薄壁細(xì)胞可以保持在同一狀態(tài)下,而不出現(xiàn)分化。通過(guò)改變各種環(huán)境因子,如溫度、光照、培養(yǎng)基成分誘導(dǎo)和控制細(xì)胞分化。在實(shí)際生產(chǎn)中對(duì)細(xì)胞分化影響最大的物質(zhì)是生長(zhǎng)素和蔗糖。此外,有證據(jù)表明細(xì)胞分裂素和赤霉素也參與木質(zhì)部的形成。一般說(shuō)來(lái),低濃度的生長(zhǎng)素對(duì)木質(zhì)部的形成有刺激作用,但超過(guò)一定水平后,木質(zhì)部的分化程度和生長(zhǎng)素的含量就呈現(xiàn)反比的關(guān)系。另外,生長(zhǎng)素對(duì)維管組織分化的影響似乎與糖的存在有密切聯(lián)系。在較低的生長(zhǎng)素水平下,愈傷組織中木質(zhì)部和韌皮部組織的相對(duì)形成量可以通過(guò)改變培養(yǎng)基中蔗糖的濃度而得到控制。例如,當(dāng)瓊脂中含有0.05mg/L IAA和1%蔗糖時(shí),Syringa愈傷組織中僅出現(xiàn)少量的木質(zhì)部成分。如果IAA水平保持不變,將蔗糖濃度提高1倍,木質(zhì)部的形成量就較多,同時(shí)有少量韌皮部出現(xiàn)。當(dāng)蔗糖濃度達(dá)到2%~4%時(shí),木質(zhì)部和韌皮部組織同時(shí)分化。假如把蔗糖進(jìn)一步提高到5倍,愈傷組織中形成的維管組織的主要成分是韌皮部,僅有少量木質(zhì)部。另外,有的雙糖如麥芽糖和海藻糖(Trehalose)對(duì)植物愈傷組織中的導(dǎo)管分化有促進(jìn)作用,而葡萄糖、果糖和其他單糖則沒(méi)有這樣的作用。細(xì)胞分裂素對(duì)木質(zhì)部分化的促進(jìn)效應(yīng)往往是與生長(zhǎng)素協(xié)同作用而產(chǎn)生的。在百日(Zinnia elegans)的單細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的共同使用也促進(jìn)導(dǎo)管成分的分化。赤霉素和生長(zhǎng)素之間的相互作用也能對(duì)木質(zhì)部的分化產(chǎn)生積極作用。

  無(wú)論是在離體還是在活體條件下,植物細(xì)胞分化的研究重點(diǎn)是維管組織的分化,特別是木質(zhì)部成分的分化。由于技術(shù)上的困難,對(duì)韌皮部分化過(guò)程的研究較少。在經(jīng)過(guò)離析的植物組織中,導(dǎo)管分子很容易染色,但小而纖細(xì)的篩管卻不行。導(dǎo)管分子的分化過(guò)程現(xiàn)在已成為研究植物組織培養(yǎng)中細(xì)胞分化問(wèn)題的一個(gè)模式系統(tǒng)。

  在一個(gè)完整的植株中,組織分化是以一種固定的方式進(jìn)行的,這種方式在不同物種和不同器官中各有不同的特征。在某些已知的條件下,愈傷組織培養(yǎng)物可保持純薄壁組織狀態(tài),不具有任何維管成分,這種愈傷組織對(duì)研究各種理論因子對(duì)維管組織分化過(guò)程的影響是一種很有價(jià)值的系統(tǒng)。

  現(xiàn)在已知,生長(zhǎng)素和蔗糖是對(duì)維管組織分化過(guò)程有顯著影響的兩種物質(zhì),它們能從質(zhì)和量?jī)蓚(gè)方面影響維管組織的分化。某些證據(jù)還指出,細(xì)胞分裂素和赤霉素也可能與木質(zhì)部分化過(guò)程有關(guān)。

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