外植體的選擇與滅菌是植物組培快繁中的重要環(huán)節(jié)，它由原培養(yǎng)材料、滅菌劑、滅菌方法等因素決定，尋找快速、高效的滅菌方法，減少污染瓶的丟棄，對(duì)于降低成本具有重要的意義。

　　1、方法對(duì)成功率的影響

　　大量的試驗(yàn)證明，0.1%的升汞是最理想的殺菌劑，但滅菌時(shí)間要求極為嚴(yán)格。時(shí)間過(guò)短，殺菌不徹底，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)對(duì)組織細(xì)胞有殺傷作用，不利于外植體誘導(dǎo)分化。在殺菌方式的比較試驗(yàn)中看出，不同的清洗方式對(duì)外植體的殺傷率和成活率影響極大，通過(guò)磁棒攪動(dòng)沖洗能夠加大對(duì)升汞殘留的沖洗，減少對(duì)材料的殺傷作用，降低褐化率，提高成功率。

　　2、外植體的幼嫩程度、滅菌條件對(duì)其成活率的影響

　　外植體的幼嫩程度不同，其含菌量也不同，所需的滅菌條件也有差異。從酒精濃度、0.1%升汞滅菌時(shí)間兩個(gè)方面進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果表明：幼嫩的外植體材料（如幼葉、幼芽、幼莖段）幼嫩的材料比老材料帶菌量少，不僅所需0.1%的升汞的滅菌時(shí)間短，在7-9分鐘之間能達(dá)到滅菌效果，而且酒精可用50%來(lái)代替70%，酒精濃度的降低，可以減少對(duì)材料的傷害，不降低其粘著效能，有利于升汞的殺菌作用，提高外植體的成活率。老的材料（如半木質(zhì)化、木質(zhì)化的莖段）莖段內(nèi)生菌較多，皮部粗糙，所需0.1%升汞滅菌的時(shí)間就長(zhǎng)（在9-12分鐘之間），且必需用70%的酒精，才能起到較好的滅菌效果。根據(jù)不同接種材料，采用不同的措施，就會(huì)減少不必要的失敗和投資經(jīng)費(fèi)，提高成功率。

　　3、不同品種外植體及取材季節(jié)對(duì)成活率的影響

　　在接種外植體時(shí)，有的材料易發(fā)生褐變現(xiàn)象，它的產(chǎn)生可分為兩種形式：一種是由于細(xì)胞受脅迫條件等不利條件影響所造成的死亡或自然發(fā)生的細(xì)胞死亡而引起的；另一種是材料傷口處分泌出的酚類化合物引起的，前者可以通過(guò)采取適當(dāng)?shù)拇胧┗蛘哂鷤�組織適應(yīng)了脅迫環(huán)境就不再發(fā)生褐變，而后者很難清除，嚴(yán)重影響外植體的誘導(dǎo)分化。只有選擇合理的外植體，才能降低褐變現(xiàn)象，大部分易褐變的材料，從11月份到第二年2月份褐變率很低，隨著進(jìn)入生長(zhǎng)季節(jié)，褐變率逐漸上升，在5、6、7、8月份達(dá)到最高峰，然后自9月份后褐變率逐漸下降直到不再發(fā)生，為此對(duì)易褐變的外植體應(yīng)在11月到2月取材，通過(guò)培養(yǎng)箱內(nèi)水培催芽取幼嫩部分，或待接種材料放入溫室內(nèi)，保持半木質(zhì)化，可獲得理想的原始培養(yǎng)材料。

　　外植體所帶菌的種類、數(shù)量與材料種類和取材季節(jié)有關(guān)，同時(shí)，材料成活率的高低與材料取材的時(shí)間及材料本身特性也有關(guān)。試驗(yàn)表明，上年11月份到下年4月份取材最好，4月份到6月份與9月份到11月份取材較好，6月份到9月份較差。試驗(yàn)中污染若以細(xì)菌為主則成功率高,如平邑甜茶、月季、櫻桃、楊樹(shù)等；以真菌為主則成功率低，如冬棗、花椒、茶樹(shù)等；一品紅由于本身分泌白色乳狀物，滅菌較困難成功率亦較低。因此選擇適宜的基因型材料，適時(shí)接種，可大大提高成功率，減少投資損失。