中國(guó)學(xué)者建立全新植物基因連接與克隆系統(tǒng)
記者近日從中科院昆明植物研究所獲悉,在中科院“百人計(jì)劃”、國(guó)家自然基金等項(xiàng)目的支持下,該所胡向陽研究組的博士王春濤和孔翔祥等人建立了一套全新的基因連接與克隆系統(tǒng)。該成果發(fā)表在《公共科學(xué)圖書館·綜合》上。
據(jù)胡向陽介紹,隨著高通量測(cè)序技術(shù)的普及與基因組信息爆炸式的增長(zhǎng),解析基因與基因組蘊(yùn)藏的功能信息成為人們了解生命密碼的必需步驟。功能基因研究是破解基因組信息的重要手段之一,而功能基因的研究離不開載體的構(gòu)建與轉(zhuǎn)基因方法。
“傳統(tǒng)的載體構(gòu)建耗時(shí)耗力,伴隨著煩瑣的酶切與連接手段,成功構(gòu)建一個(gè)用于植物轉(zhuǎn)化的載體往往需要幾天甚至幾個(gè)星期的時(shí)間。”胡向陽說,有時(shí)操作人員因?yàn)檎也坏竭m合的酶切位點(diǎn)而頭痛不已,這些都是限制功能基因研究的瓶頸問題。
為此,王春濤和孔翔祥等基于TA克隆技術(shù),建立了一套全新的基因連接與克隆系統(tǒng),該套系統(tǒng)完全克服了傳統(tǒng)克隆過程中的難題,并具有操作簡(jiǎn)易、高效、穩(wěn)定等特點(diǎn)。
同時(shí),研究人員還將這套系統(tǒng)成功地運(yùn)用于水稻與擬南芥的原生質(zhì)轉(zhuǎn)化、蛋白細(xì)胞定位以及擬南芥穩(wěn)定轉(zhuǎn)化等功能基因研究。
一系列證據(jù)表明,利用這套系統(tǒng)構(gòu)建的載體,目標(biāo)基因可以穩(wěn)定高效地在擬南芥中表達(dá),獲得的轉(zhuǎn)基因材料可以用于下一步的生理生化與功能分析。
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